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News如何選擇和使用 XBridge C18 色譜柱？
更新時(shí)間：2025-03-21 點(diǎn)擊次數(shù)：224次
XBridge C18 色譜柱是 Waters 公司推出的一款高性能反相色譜柱，廣泛應(yīng)用于液相色譜（HPLC）和超高效液相色譜（UHPLC）分析中。它采用了第二代無機(jī)/有機(jī)雜化顆粒技術(shù)（BEH 技術(shù)），具有優(yōu)異的化學(xué)穩(wěn)定性和機(jī)械強(qiáng)度。
一、為什么選擇 XBridge C18 色譜柱？
1、寬 pH 范圍
XBridge C18 色譜柱能夠在 pH 1-12 的范圍內(nèi)保持優(yōu)異的化學(xué)穩(wěn)定性。這意味著無論你分析的是酸性、中性還是堿性化合物，色譜柱都能穩(wěn)定工作。例如，在高 pH 條件下，其穩(wěn)定性比傳統(tǒng)硅膠基質(zhì)色譜柱高出 10 倍以上。
2、低柱滲漏
該色譜柱具有極低的柱滲漏，特別適合高靈敏度的 LC-MS 聯(lián)用分析。低滲漏可以減少雜質(zhì)離子對(duì)檢測(cè)信號(hào)的干擾，提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。
3、優(yōu)異的峰形
XBridge C18 色譜柱通過專有的三鍵鍵合和封端技術(shù)，顯著改善了堿性化合物的色譜峰形。這意味著在分析堿性藥物成分或生物分子時(shí)，你將獲得更對(duì)稱、無拖尾或前伸的色譜峰，從而提高定量分析的準(zhǔn)確性。
4、高柱效
采用 BEH 顆粒技術(shù)，XBridge C18 色譜柱能夠提供高柱效。高柱效意味著更窄的色譜峰和更高的分辨率，特別適合快速分析和復(fù)雜樣品的分離。
5、長(zhǎng)使用壽命
即使在苛刻的使用條件下，XBridge C18 色譜柱也能保持穩(wěn)定的性能和較長(zhǎng)的使用壽命。這意味著你可以減少更換色譜柱的頻率，降低實(shí)驗(yàn)成本。
二、如何選擇合適的 XBridge C18 色譜柱？
1、粒徑選擇
XBridge C18 色譜柱提供多種粒徑選擇，包括 2.5µm、3.5µm和5µm：
（1）2.5µm：適用于超高效液相色譜（UHPLC），能夠提供更高的柱效和更快的分析速度，但需要更高的壓力。
?。?）3.5µm：適用于常規(guī) HPLC 和 UHPLC，平衡了柱效和壓力，適合大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室。
（3）5µm：適用于常規(guī) HPLC，壓力較低，適合老舊設(shè)備或?qū)χб蟛桓叩膽?yīng)用。
2、柱尺寸選擇
色譜柱的內(nèi)徑和長(zhǎng)度也會(huì)影響分離效果：
?。?）內(nèi)徑：常見的內(nèi)徑有2.1mm、3 mm和4.6mm。較小的內(nèi)徑（如 2.1mm）適合微量分析和梯度洗脫，能夠減少溶劑消耗；較大的內(nèi)徑（如 4.6 mm）適合常規(guī)分析和高通量檢測(cè)。
?。?）長(zhǎng)度：常見的長(zhǎng)度有50mm、75mm、100mm、150mm和 250mm。較短的色譜柱（如50mm）適合快速分析，但分辨率較低；較長(zhǎng)的色譜柱（如 250 mm）能夠提供更高的分辨率，但分析時(shí)間較長(zhǎng)。
3、應(yīng)用需求
根據(jù)你的具體應(yīng)用需求選擇合適的色譜柱：
?。?）生物醫(yī)學(xué)研究：如果分析蛋白質(zhì)、肽或寡核苷酸，建議選擇 小粒徑（2.5µm或3.5µm）和較長(zhǎng)的色譜柱（150 mm 或 250 mm），以獲得高分辨率和高靈敏度。
?。?）藥物研發(fā)：對(duì)于藥物成分的分離和純化，可以選擇 3.5µm或 5µm的色譜柱，內(nèi)徑根據(jù)樣品量和分析通量選擇。
?。?）環(huán)境分析：如果檢測(cè)環(huán)境樣品中的復(fù)雜成分，建議選擇高柱效的 2.5µm或3.5µm色譜柱，以實(shí)現(xiàn)更好的分離效果。
?。?）食品檢測(cè)：對(duì)于檢測(cè)食品中的添加劑或污染物，可以選擇常規(guī)的 5µm色譜柱，內(nèi)徑根據(jù)樣品通量選擇。
三、XBridge C18 色譜柱的使用與維護(hù)
1、使用前準(zhǔn)備
?。?）平衡色譜柱：在使用前，使用適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相平衡色譜柱，通常需要 10-20 個(gè)柱體積 的流動(dòng)相。例如，對(duì)于一個(gè)150mm×4.6 mm的色譜柱，大約需要10mL的流動(dòng)相。
（2）檢查系統(tǒng)：確保液相色譜系統(tǒng)沒有泄漏，泵和檢測(cè)器的性能良好。
2、使用注意事項(xiàng)
?。?）避免惡劣條件：雖然 XBridge C18色譜柱具有寬 pH 范圍，但在特殊pH 條件下（如 pH < 1 或 pH > 12），仍需謹(jǐn)慎使用。
（2）控制流速：根據(jù)色譜柱的規(guī)格選擇合適的流速。例如，對(duì)于 4.6mm × 150mm 的色譜柱，建議流速為 1.0 mL/min。
（3）避免過壓：不要超過色譜柱的最大耐壓值。例如，對(duì)于5µm的色譜柱，最大耐壓為 400 bar。
3、維護(hù)與清潔
?。?）定期沖洗：每次使用后，用適當(dāng)?shù)娜軇ㄈ缂状蓟蛞译妫_洗色譜柱，以去除殘留的樣品和雜質(zhì)。
（2）避免反向沖洗：XBridge C18 色譜柱通常不建議反向沖洗，因?yàn)檫@可能會(huì)損壞篩板。
?。?）存儲(chǔ)條件：將色譜柱存儲(chǔ)在 20% 甲醇水溶液 中，避免干燥。
四、常見問題解答
1、可以用于梯度洗脫嗎？
可以。XBridge C18適用于梯度洗脫，能夠提供良好的分離效果。在梯度洗脫過程中，建議使用小內(nèi)徑（如2.1mm）的色譜柱，以減少溶劑消耗。
2、使用壽命一般是多久？
XBridge C18 色譜柱的使用壽命因使用條件和維護(hù)情況而異。在良好的維護(hù)下，色譜柱可以使用 數(shù)千次進(jìn)樣。如果發(fā)現(xiàn)色譜峰變寬、拖尾或柱壓異常升高，可能需要更換色譜柱。
3、可以用于 LC-MS 聯(lián)用分析嗎？
可以。XBridge C18具有極低的柱滲漏，特別適合高靈敏度的 LC-MS 聯(lián)用分析。
XBridge C18 色譜柱憑借其優(yōu)異的性能和廣泛的適用性，成為色譜分析領(lǐng)域中的可靠選擇。通過合理選擇粒徑和柱尺寸，以及正確使用和維護(hù)色譜柱，你將獲得更穩(wěn)定、高效的分析結(jié)果。
